前言 D3胚胎移植与D5囊胚移植术后的患者能否采用同一套血清β-hCG值预测标准仍需要进一步研究； 两次血清β-hCG连续检测有利于提高预测准确性，有研究显示血清β-hCG的倍增速度反映了滋养细胞的发育情况，可以作为监测正常与异常妊娠的临床标记物；本研究旨在研究不同天数移植后14天血清β-hCG以及翻倍值与临床结局的关系，以及比较不同天数移植后14天血清β-hCG以及18天血清β-hCG翻倍值。
一、研究对象及分组
纳入标准:
(1) 取卵后第3天或第5天行新鲜周期单胚胎/囊胚移植；
(2) 移植术后14天血清β-hCG≥50mIU/ml;
(3) 统计资料完整。
排除标准：
(1) 移植胚胎数>1个；
(2) 植入前遗传学诊断PGS/PGD的胚胎建立的妊娠；
(3) 新鲜周期全胚冷冻。
二、资料与方法
● 倾向匹配评分1：1处理混杂变量(如果匹配后仍有差异对仍有差异的参数进行二次匹配(不放回抽样，默认最近邻法，若匹配后基础资料仍有差距则改为半径匹配法，卡钳值设为0.02)。
● K-S检验进行正态性验证，符合正态分布的计量资料组间比较采用t检验；不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-whitney U检验，计数资料以构成比或率(%)表示，组间比较采用卡方检验。
● Spearman相关分析计算相关关系。
三、结果
● 生化妊娠及临床妊娠周期移植后14天β-hCG比较
422.61 /54.80=7.712；966.74 /127.81=7.564
● 流产及活产周期移植后14天β-hCG比较
467.63.61/182.28=2.565；966.00/458.46=2.103
● 移植后14天血清 β-hCG与临床妊娠相关关系
● 移植后14天血清 β-hCG与活产相关关系
● 第3天移植及第5天移植后14天 β-hCG及结局比较
● 生化妊娠及临床妊娠周期移植后14-18天β-hCG翻倍值比较
5.14/ 1.08=4.759；4.79/ 1.07=4.477
● 流产及活产周期移植后14-18天β-hCG翻倍值比较
5.66 / 3.13=1.808；4.89 / 3.36=1.455
● 移植后14-18天血清β-hCG翻倍值与临床妊娠相关关系
● 移植后14-18天血清β-hCG翻倍值与活产相关关系
● 第3天移植及第5天移植后14-18天β-hCG翻倍值及结局比较
① 在匹配后新鲜D3胚胎移植和D5囊胚移植中，临床妊娠组的14天血清β-hCG水平和14-18天血清 β-hCG翻倍值均要高于生化妊娠组。活产组的14天血清β-hCG水平和14-18天血清 β-hCG翻倍值均要高于流产组。
② 14天血清β-hCG及14-18天血清β-hCG翻倍值与临床妊娠和活产均显著正相关。
③ 在匹配后所有周期及临床结局为临床妊娠或活产的周期中，D3胚胎移植组的14天血清β-hCG水平均低于D5囊胚移植组。在匹配后所有周期中，D3胚胎移植组的临床妊娠率和活产率均低于D5囊胚移植组。
④ 两组的14-18天血清β-hCG翻倍值在匹配后所有周期中无显著差异，但在临床结局限定为临床妊娠或活产的周期中，D3胚胎移植组的14-18天血清β-hCG翻倍值高于D5囊胚移植组，在匹配后所有周期中，D3胚胎移植组的临床妊娠率和活产率均低于D5囊胚移植组。
⑤ D3胚胎移植和D5囊胚移植的周期顺利临床妊娠后，其活产率无明显区别。
四、讨论
1、不同时期移植后14天血清β-hCG临床结局的差异
匹配后所有周期及临床结局临床妊娠或活产的周期中，D3胚胎移植组的14天血清β-hCG水平均低于D5囊胚移植组。匹配后所有周期中，D3胚胎移植组的临床妊娠率和活产率均低于D5囊胚移植组。
① 胚胎发育潜力：体外延长培养时间可以筛选出发育潜力更强胚胎，从而在植入着床和进一步发育的过程中存在优势。
③ 子宫容受性：超高水平的雌激素和孕激素水平降低子宫内膜容受性，不利于胚胎着床。
③ 胚胎-子宫同步化：囊胚期移植胚胎发育和子宫内膜同步，更符合子宫生理环境，缩短了胚胎进一步发育与着床之间的间隔，减少母胎之间不利因素的影响。
④ 胚胎自身β-hCG值影响：2细胞就有β-hCG mrna表达，胚胎较高的hCG水平可能会刺激孕激素的产生从而刺激滋养细胞的侵袭。
● 无论是14天β-hCG值，还是14-18天β-hCG翻倍值，其在D3胚胎移植组中与活产的相关性较D5囊胚移植组有较大优势，提示临床医生在D3卵裂期移植中更为关注两者指标的必要性。
● 但本研究并不支持14-18天血清β-hCG翻倍值的预测作用可以替代单日β-hCG的结论。
● 无论是D3胚胎移植组还是D5囊胚移植组，14天β-hCG值与活产的相关性都要高于14-18天血清β-hCG翻倍值与临床结局的相关性。14天血清β-hCG值预测活产的约登指数都要大于用14-18天血清β-hCG翻倍值预测活产的约登指数。
● 但是无论是D3胚胎移植组还是D5囊胚移植组14天β-hCG值与临床妊娠的相关性与14-18天血清β-hCG翻倍值与临床妊娠的相关性差距不大。且14天血清β-hCG值预测临床妊娠的约登指数都要小于用14-18天血清β-hCG翻倍值预测临床妊娠的约登指数。
● 14-18天血清β-hCG翻倍值可以作为单日β-hCG的辅助指标，在早期预测临床妊娠方面占有一定优势，而对于临床妊娠的预测能力是临床医生期待的。
2、不同时期移植后14-18天血清β-hCG翻倍值的差异
两组的14-18天血清β-hCG翻倍值在匹配后所有周期中无显著差异，但在临床结局限定为临床妊娠或活产的周期中，D3胚胎移植组的14-18天血清β-hCG翻倍值高于D5囊胚移植组，在匹配后所有周期中，D3胚胎移植组的临床妊娠率和活产率均低于D5囊胚移植组。
● 胚胎发育潜力，D3胚胎移植的成熟度和平均质量较差；
● 子宫容受性与胚胎—子宫同步化；
● 胚胎自身 β-hCG值影响；
● 卵裂期 选择ICSI的胚胎的性别比例偏向女性，D3移植的女性比例相对D5可能更高。而体外培养的早熟X染色体失活，ICSI诱导的雌性囊胚外胚层细胞减少，可能导致胚胎着床后早期女性死亡率优先。
导致总体周期中D3移植的平均翻倍值有所下降，最终结果D3胚胎和D5囊胚14-18天血清 β-hCG翻倍值无差异。
● 越早期血清β-hCG水平与移植胚胎本身的发育阶段，成熟度和质量相关度更大，囊胚期移植胚胎细胞有滋养层细胞，可以更早分化并优先分泌血清β-hCG，而后与着床位置，血流水平，内膜质量，激素水平关系更密切，Day3ET活产与流产组，14-18天血清β-hCG翻倍值的比值差距都要大于day5ET，临床妊娠组与非临床妊娠组亦然，说明Day3ET胚胎需要更快地翻倍速度才能顺利妊娠和活产。限定临床结局为临床妊娠组和活产后，在临床妊娠组和活产组中D3胚胎移植组14-18天血清β-hCG翻倍值均大于D5囊胚移植组。
3、意义与不足
意义：① 早期妊娠生物标志物及其基于移植后时间的倍数变化可以为医生和患者提供预测和适当的参考；② 卵裂期移植和囊胚期移植血清β-hCG及翻倍值变化的不同的研究也有助于在不同时期移植时制定不同的预测标准；③ 对其差异的程度及机理研究有助于丰富对早期胚胎发育与血清β-hCG分泌变化的认知。
不足：① 本研究是一项回顾性单中心研究，也没有对研究组随机分组；② 人群代表性有待验证，可能存在偏移，需要多中心的合作，增加样本量以及有条件下进一步的前瞻性研究来探索；③ 同时我们测量的是移植术后而非受精后相同日期的β-hCG；④ 胚胎的质量，性别，辅助孵化率有待控制。
备注：以上内容出自 中华医学会第十七次生殖医学学术会议 专题讲座
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