Zhou Shuang（周爽）：
硕士，生殖与干细胞工程学院，中南大学，中国。
湖南光谷医院技术员。
正如我们所知，在过去的几年里，PGT 经历了几次方法论和技术上的进步。外胚层活检（TE 活检）已经取代了卵裂球活检，并且有越来越多的证据支持它的安全性、可靠性和临床价值。分析技术从传统的FISH转变为CCS（全面染色体筛查），如SNP array（SNP微阵列），qPCR（定量 PCR）,array CGH( 比较基因组杂交 )，以及最近的 NGS( 二代测序技术 )。最近研究表明，NGS 和高密度比较基因组杂交可以分辨出大多数囊胚的 TE 活检标本中的嵌合体。
然而嵌合体胚胎的生殖潜力仍然存在争议。有病例系列报道了移植嵌合体胚胎之后仍然生出健康婴儿的例子。这些研究表明，与整倍体胚胎移植相比，嵌合体胚胎移植妊娠结局更差：妊娠率更低，流产率更高。
定义：三条或三条以上染色体/片段嵌合，嵌合比例在30%-70%之间
发生率：美国生殖遗传学数据库报道通过NGS方式检测发现胚胎复杂嵌合体发生率为4.92%（1436/29195）
表中显示复杂嵌合体胚胎移植后的临床结局
什么是复杂嵌合体？复杂嵌合体的定义是三条或三条以上染色体 / 片段嵌合，嵌合比例在 30%-70% 之间。美国生殖遗传学数据库报道通过 NGS 方式检测发现胚胎复杂嵌合体发生率为 4.9%。此外一些研究表明，与简单嵌合体胚胎相比，复杂嵌合体胚胎显著降低了移植率并提高了流产率。
PGDIS建议：如果没有整倍体胚胎可用于移植，且不能再次进行新的IVF周期，这时非复杂性的、低水平嵌合比例胚胎可用于移植
COGEN建议：复杂嵌合体胚胎（嵌合发生在多条染色体之间）不建议移植
此外，植入前基因诊断国际学会提供了关于嵌合体胚胎的 PGT实践建议，表示与其他类型的嵌合体相比，复杂嵌合体胚胎应具有最低的优先级。COGEN 也表示，在多条染色体间观察到复杂嵌合体的情况下，不建议移植。
问题：PGT检测中胚胎复杂嵌合的发生率是多少？在临床实践中如何管理这些胚胎？
我们研究的问题是 PGT 检测中胚胎复杂嵌合的发生率是多少？在临床实践中如何管理这些胚胎？当 PGT 的结果是复杂嵌合体时，严格意义上，患者可优先移植可用的整倍体胚胎或简单嵌合体胚胎。然而，在没有整倍体或简单嵌合体胚胎的情况下，患者必须选择是否将其移植，并承担不良结果的风险或丢弃并开始一个新的周期。
2018-2019 年，中信湘雅遗传与生殖专科医院共对 17979 枚囊胚进行了滋养层细胞活检
我们对检测为复杂嵌合体的胚胎解冻后行二次活检、NGS 分析、再次玻璃化冷冻，对二次活检为整倍体的囊胚解冻后移植
这一研究经过中信湘雅遗传与生殖专科医院伦理委员会批准
本研究对我们中心产生的囊胚进行了 TE 活检和 NGS 基因检测。复杂嵌合体夫妇解冻冷冻保存的复杂嵌合体胚胎，进行第二轮活检、NGS 分析、玻璃化冷冻，再次温育整倍胚胎以进行冻融胚胎移植。本研究获得湘雅生殖遗传医院伦理委员会批准。所有的夫妇都签署了知情同意书。
我中心复杂嵌合的发生率 2.4%（437/17979）
其它年龄组与＜ 35 岁组相比，复杂嵌合的发生率没有显著差异
从形态学对囊胚质量评估与胚胎复杂嵌合的发生无明显相关性
高质量囊胚组、一般囊胚组、低质量囊胚组复杂嵌合的发生率没有差异
接下来是研究结果。
首先，我中心复杂嵌合的发生率是 2.4%，其它年龄组与＜ 35 岁组相比，复杂嵌合的发生率没有显著差异。同时，从形态学对囊胚质量评估与胚胎复杂嵌合的发生无明显相关性。
结果2：复杂嵌合胚胎二次活检结果
89枚复杂嵌合胚胎进行二次活检，复苏成活率96.6%（86/89）
61.6%（53/86）的胚胎二次活检被检测为整倍体
33枚胚胎二次活检仍为非整倍体，在这些胚胎中，只有33%（11/33）的胚胎二次活检与第一次活检均为相同染色体嵌合，9%（3/33）的胚胎与第一次活检相比有互补染色体嵌合
我们还分析了二次活检的整倍体情况。有 89 个复杂嵌合胚胎被二次活检，复苏成活率 96.6%（86 个）。在 86 个二次活检的样本中，有 53 个胚胎被检测为整倍体。33 枚胚胎二次活检仍为非整倍体，在这些胚胎中，11 个胚胎二次活检与第一次活检均为相同染色体嵌合，3个胚胎与第一次活检相比有互补的染色体嵌合。
结果3：在复杂嵌合体胚胎中胚胎质量与二次活检结果的关系
低质量囊胚非整倍体发生率高于一般囊胚（19%vs7%,p=0.0037）和高质量囊胚组（19%vs0%,p=0.032）
我们还分析了胚胎质量与二次活检结果的关系，（结果表明）低质量囊胚非整倍体发生率高于一般囊胚和高质量囊胚组。而且，高质量囊胚似乎比低质量囊胚和一般囊胚具有更高的整倍率。所以没有显著差异。
结果3：二次活检胚胎的临床结局
二次解冻后胚胎复苏率100%（18/18），妊娠率38.9%（7/18），目前已有4名健康婴儿出生
如果二次活检的结果是整倍体，就表明囊胚中含有正常的细胞。并且在与患者签订知情同意书后，可以考虑进行胚胎移植。截至目前，已经对被检测过的囊胚进行了 18 个冷冻胚胎移植周期。所有的胚囊都已经被温育复苏并存活了下来。在所有18个二次活检囊胚移植中，移植存活率为44.4%，持续妊娠率为38.9%，已有4名健康胎儿出生。
我的研究结论是， 复杂嵌合体胚胎的发生率约为 2.4%（437/17979）。复杂嵌合的发生与女方年龄和形态学上胚胎质量评分无关。对于只有复杂嵌合体胚胎的患者，二次活检能够挽回部分整倍体胚胎并用来移植，这样可以提高每一刺激周期的累积妊娠率。
【关键词】备孕 二次活检 复杂嵌合胚胎 反复流产 胎停
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