少弱精子症和无精子症患者中凋亡相关的microRNA可能揭示冷冻损伤的新研究（⬅点击左侧文字观看视频）
研究问题：通过microRNA等生物标记物选择非凋亡精子是否能提高解冻后受精能力？
简要回答：与凋亡和氧化应激标记物（如microRNA）相关的生物学改变可能在冷冻保存期间保护精子的功能和生育能力。
已经知道的是：研究了冷冻保存精子的生物学变化，如抗冷冻损伤的microRNA。结果表明，精子活力和禁欲期等参数会影响解冻后精子存活率。最近的研究报道，与精子运动过程、精子结构和凋亡相关的microRNA在冷冻保存后的不同表达相关。更全面的研究需要充分提到微RNA的作用及其与冷冻保存中其他生物标志物的相关性。
研究设计、规模、持续时间：我们的研究对象是58名24-40岁的男性。他们的射精样本被分类为严重（浓度低于500万精子/mL）少弱精子症（SOAT）、轻度（浓度500万至1000万精子/mL）少弱畸胎精子症（MOAT）、阻塞性无精子症（OA），非阻塞性无精子症（NOA）（精液中没有精子）和正常组（浓度超过1500万精子/mL）。然后将每个样品分为新鲜样品和低温保存样品。
参与者/材料，地点，方法：采用密度梯度离心法（DGC）冷冻解冻后获得无圆形细胞的高质量精子。睾丸组织活检在睾丸精子提取术（TESE）后进行。然后采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测冷冻前后的生物标志物，包括microRNA-122（miR-122）、miR-383、miR-15b、miR-184、miR-34c和靶基因，如P53、Caspase9和CYCLIN D1。谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）使用成像多模式阅读器。
主要结果和偶然性的作用：与新鲜不育组相比，冷冻保存不育组（MOAT和SOAT）的精子总活力和形态显著降低。在冷冻-解冻过程中，寡弱动粒精子GPx活性水平的降低与MDA浓度的增加有关。还显示SOD水平升高，DNA断裂。我们的数据表明，与新鲜组相比，MOAT冷冻组（P=0.0174）和NOA冷冻组（P=0.0001）的细胞周期蛋白D1显著减少。我们在冷冻保存组中观察到高水平的Capase9和（P=0.01）。与新鲜组相比，NOA冷冻组（P=0.0064）和OA冷冻组（P=0.0441）中miR-34c的表达显著增加。与NOAFresh相比，NOA Cryo中miR-184（P=0.0275）的表达增强。定量RT-PCR显示，与新鲜SOAT相比，冷冻SOAT中的miR-383表达水平显著降低（P=0.0223）。
另一方面，在冷冻过程中，NOA组的miR-383表达水平显著升高（P=0.0437），OA组的miR-383表达水平无显著升高。与新鲜组相比，MOAT和SOAT冷冻组的miR-122和miR-15b没有显著减少。我们观察到冷冻后OA组中miR-122（P=0.0109）和miR-15b（P=0.0322）的表达降低。此外，与新鲜相比，NOA Cryo中的miR-15b水平显著升高（P=0.0234）
局限性、谨慎理由：由于伦理原则，我们无法从正常人群中获取睾丸样本。因此，我们相互分析了NO和OA组
研究结果的更广泛含义：我们的研究证明，总的运动能力可以被微RNA干扰。这种现象影响解冻后精子的总运动能力。在不孕症患者中，MDA水平的升高也可能干扰microRNA的调节。这些非编码RNA可能被称为冻融策略发展的生育力生物标记物。
试用注册号码：60961
