绿茶儿茶素EGCG和EGCG前药（前EGCG）通过靶向调节巨噬细胞和B细胞的分子抑制子宫内膜异位症（⬅点击左侧文字观看视频）
研究问题：绿茶EGCG和前EGCG治疗子宫内膜异位症的治疗靶点和机制是什么？
摘要：EGCG和前EGCG具有独特的分子靶点，可调节B细胞、巨噬细胞和子宫内膜异位症细胞的相互作用，并限制子宫内膜异位症的生长和发展。
我们已经知道：目前子宫内膜异位症的治疗主要是激素抑制和手术切除。我们以前的研究表明EGCG显著抑制小鼠实验性子宫内膜异位症的发展。促EGCG在抗子宫内膜异位症、抗血管生成和抗氧化方面比EGCG更有效（Wang等人，2013；徐等人，2011年）。在子宫内膜异位症患者中发现巨噬细胞和B细胞的免疫功能失调。EGCG和前EGCG的分子靶点、潜在机制、不同的治疗效果以及它们的抗炎活性尚不清楚。
研究设计、规模、持续时间：采用多重蛋白质组整体稳定性改变（PISA）分析（Gaetani等人，2019），然后采用MS/MS，以确定子宫内膜异位症细胞中EGCG和前EGCG的分子靶点。对小鼠子宫内膜异位症细胞系和子宫内膜异位症模型进行EGCG和前EGCG的药理学研究，以表征其抗子宫内膜异位症和抗炎作用。进行了基因沉默和过度表达实验以证实其免疫调节机制。
参与者/材料，环境，方法：培养和裂解的子宫内膜异位症（Hs832（C）T）细胞系进行化学蛋白质组学分析。将SiRNA和过表达载体分别转染体外细胞和体内病变细胞。用Hs832（C）、T、单核细胞（THP-1）和对照B细胞（Raji-null）系进行共培养实验，以研究子宫内膜异位症细胞和免疫细胞在体外的相互作用。建立子宫内膜异位症小鼠模型，对病变进行免疫染色和微阵列分析，以表征体内的分子途径。
主要结果和偶然性的作用：MTDH和PXK分别是EGCG和前EGCG在Hs832（C.T）细胞裂解物和细胞培养物中最强和最差的靶点。体外和体内蛋白质靶点的基因沉默和过度表达显著改变下游蛋白质的表达，包括PXK后的BLK和EGF，MTDH后的MYC和AKT，以及子宫内膜异位症相关基因，如VEGFC和MMP9。Hs832（C）.T与Raji-null或THP-1诱导的巨噬细胞的共培养分析表明，重组蛋白培养后PXK、MTDH、下游靶点和免疫相关基因的表达显著增加，但EGCG和前EGCG治疗后显著降低。在体外和体内治疗后，M1和M2巨噬细胞以及B细胞显著减少。病变的双重免疫荧光染色显示CD68、CD163或CD20与MTDH、PXK和下游靶点共表达，体内治疗后共表达细胞数量显著减少。微阵列实验进一步确定了MTDH或PXK的上游和下游基因与子宫内膜异位症的生长和发展有关。
局限性和谨慎理由：这项药理学和机理研究的结果需要临床样本来验证EGCG和前EGCG的抗子宫内膜异位症作用。需要针对巨噬细胞和B细胞的其他潜在药物对子宫内膜异位症的作用。
研究结果的更广泛意义：该研究结果为EGCG和前EGCG作为子宫内膜异位症新疗法的未来发展提供了药理学和机制学数据。本研究表明巨噬细胞和B细胞可能是治疗子宫内膜异位症的潜在治疗靶点，这为子宫内膜异位症的新型免疫治疗开辟了新的前景。
试验注册号码：NA
