反复流产或反复植入失败患者和健康对照组子宫微生物群的周期内变化（⬅点击左侧文字观看视频）
研究问题：子宫微生物群：健康对照组、复发性流产（RM）和复发性植入失败（RIF）患者月经周期的三个主要时间点是否存在差异？
总结回答：与对照组相比，RM和RIF患者在整个月经周期中子宫微生物群发生改变，乳酸杆菌的优势度较低。
已经知道的是：与先前的不孕子宫的概念相反，细菌在子宫和胎盘中的定植已经被证实。研究表明，以乳酸杆菌为主的子宫内膜微生物群与生殖成功相关。此外，非乳酸杆菌为主的微生物群的存在，特别是在子宫内膜液中检测到加德纳菌和链球菌，似乎与较低的植入率、持续妊娠率和活产率有关。然而，健康女性的周期内变化以及RM或RIF患者的可能变化仍然未知。
研究设计、规模、持续时间：共20例RM患者(≥ 3例连续流产），n=20名RIF患者(≥在本研究中，包括3例健康胚胎（无hCG）和10例冷冻胚胎（无hCG）。所有患者的月经周期均为28天。在卵泡期、排卵期和黄体期，彻底清洁宫颈后，将柔性导管引入宫腔，并用1ml氯化钠冲洗子宫。
参与者/材料、设置、方法：根据制造商的说明，使用QIAamp DNA试剂盒（Qiagen）结合PrecellysR24均质器（德国Erlangen Peqlab）提取细菌DNA。扩增了细菌16srrna基因的V3-V4区。以等摩尔比率收集样本，并使用Illumina MiSeq se淬灭剂和MiSeq试剂盒V2（250 bp配对端）进行焦磷酸测序。使用phyloseq软件包在R。
主要结果和偶然性的作用：对照组的香农指数（物种丰富度和均匀度）在排卵期显著下降，表明微生物群更加均匀（p<0.05）。这种多样性的丧失在RIF和RM患者中没有表现出来。总的来说，我们可以观察到RM与RIF患者在分类分布上有更高的相似性。纵向动力学包括厚壁菌门的增加（仅CTRL和RM）和伴随的变形菌的损失。值得注意的是，仅在RIF患者中检测到大量类杆菌。与对照组相比，放线菌在RM和RIF中更为常见。
局限性和谨慎理由：为了将潜在污染的影响降至最低，我们对阴道穹窿和子宫内膜腔的成对样本进行了预实验，结果表明总体微生物组结构存在显著差异。然而，样品路线仍然容易受到污染。
研究结果的更广泛意义：我们第一次能够显示子宫内膜微生物组的周期依赖性改变。这些发现强调了子宫内膜微生物组改变作为RM和RIF原因的作用，并有助于在微生物组失调的情况下制定未来的治疗策略。
试验注册号：Drks00020803
