
CD133+BMDSCs复合支架在Asherman综合征子宫内膜再生中的应用(⬅点击左侧文字观看视频)
研究问题:载于聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGda)和明胶中的CD133+骨髓源性干细胞(BMDSCs)能分裂蜕膜吗?
总结答案:生物相容性多孔PEGda和明胶支架为CD133+细胞在体外附着、分裂和蜕膜提供了三维环境。
已知:Asherman综合征患者子宫内膜获得性损伤导致部分至完全的子宫内膜功能障碍,从而导致宫内粘连(IUA)。本研究组先前的工作已经证实CD133+BMDSCs的植入及其旁分泌作用对Asherman综合征(AS)小鼠和人类模型的子宫内膜增生、子宫内膜厚度的改善和临床结局的影响。
研究设计、大小、持续时间:从接受自体细胞治疗的难治性AS患者中获得人CD133+BMDSCs。分析了两种不同的聚合物PEGda和明胶形成多孔支架的能力。第14天检测CD133+BMDSCs细胞的粘附和分裂情况,第5天检测CD133+BMDSCs在8-Br-cAMP作用下的体外分化情况,第5周检测CD133+BMDSCs的体内生物相容性。
对象/材料、地点、方法:采用冷冻凝胶法制备多孔PEGda和明胶支架。利用扫描电子显微镜(SEM)和显微计算机断层扫描(micro-computer tomography)对孔隙率、连通性及其分布进行了表征。用扫描电镜和荧光显微镜观察细胞的粘附、生长和形态,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞泌乳素(PRL)和IGFBP1分泌,用qPCR检测mRNA表达水平。通过皮下植入的方法分析了支架的生物相容性和降解情况。
主要结果和chance的作用:明胶(100-250μm)的平均孔径比PEGda大,PEGda具有致密的通孔结构(25-150μm)和厚壁。横截面分析显示,在这两种聚合物,以及互联孔。两种聚合物在细胞粘附和存活率方面没有显著差异(两种情况下均>80%)。IGFBP1的mRNA表达水平显著增加,变化倍数为3±2.25(PEGda)和10±1.3(明胶),而PRL为0.08±0.82(PEGda)和0.39±1.7(明胶)。随着cAMP的加入,IGFBP1(PEGda为7.4±4.5pg/ml,明胶为8.5±4pg/ml)和PRL(PEGda为4.7±1.8pg/ml,明胶为5.6±1.2pg/ml)的分泌也增加。在体内,PEGda的降解速度比明胶快(>5周),且无炎症反应。进行了皮下聚合物降解研究,以确定其降解率,诱导纤维化的效果,并测试其作为皮下植入物以帮助子宫内膜再生。
局限性,谨慎理由:这是一项体外研究。
研究结果的广泛意义:载CD133+BMDSCs的充气PEGda和明胶支架可能是一种潜在的替代方法,用于局部运送细胞,以修复因医源性破坏子宫内膜生态位引起的子宫内膜损伤。
试验注册号:不适用